
فرمت فایل : power point (لینک دانلود پایین صفحه) تعداد اسلاید : 25 اسلاید
پاورپوینت درباره آشنایی کامل فرآیند انتقال ژن یا Agroinoculation
فرمت فایل : power point (لینک دانلود پایین صفحه) تعداد اسلاید : 25 اسلاید
فرمت فایل word: (لینک دانلود پایین صفحه) تعداد صفحات : 42 صفحه
فهرست مطالب
1-1- تاریخچه همسانهسازی ژن.. 1
1-2- ابزارهای کار مهندسی ژنتیک... 2
1-4- تکنیکهای مورد استفاده در همسانهسازی.. 9
1-7- تراریختی Transformation.. 16
1-8- غربالگری α-complementation.. 16
1-9- استخراج پلاسمید و تعیین تعداد نسخه های آن.. 21
2-1- تهیه محیط کشت باکتری.. 23
2-2- کشت خطی و کشت مایع باکتری DH5α.. 24
2-4- واکنش پیوند (لیگاسیون) 26
2-5- انتقال پلاسمیدها به باکتری (ترانسفورماسیون) 27
2-7- استخراج پلاسمید نوترکیب... 30
2-7-1- استخراج پلاسمید از روش دستی.. 30
2-7-2- استخراج پلاسمید با استفاده از کیت Roche. 33
2-8- تعیین کیفیت و کمیت پلاسمید نوترکیب استخراج شده 33
فهرست شکل ها
شکل 1-1- شمای کلی انجام همسانهسازی.. 1
شکل 1-2- شمای لیگاسیون در TA Cloning. 6
شکل 1-3- تولید کنکاتمر از محصولات PCR دارای انتهای صاف.. 8
شکل 1-4- الف)باکتریوفاژ لامبدا ب) باکتریوفاژ M13.. 10
شکل 1-5- نقشه پلاسمید pTZ57R/T و مکانهای برشی آن. 13
شکل 1-7- ساختار تترامر آنزیم بتاگالاکتوزیداز 18
شکل 1-8- تنظیم اپران لاکتوز 19
شکل 1-9- استراتژی α-complementation مورد استفاده در همسانه سازی ژن ها 20
فهرست جداول
جدول 1-1- جدول بازده برش بعضی از اندونوکلئاز های متداول. 5
جدول 1-2: ساختار انتهای ′3 محصولات تولیده بوسیله Taq پلیمراز 6
جدول 1-3: عناصر ژنتیکی ناقل pTZ57R/T. 14
جدول 1-4: خصوصیات ژنتیکی باکتری DH5α.. 15
1-1- تاریخچه همسانهسازی ژن
سالهای 1971 تا 1973 را به عنوان یک دگرگونی در بیولوژی مدرن نام میبرند. در این سالها یک متدولوژی کاملاً جدید توسعه یافت و امکان داد تا آزمایشهایی که قبلاً عملی نبودند، با موفقیت طرحریزی و انجام شوند. این روشها تحت عنوان تکنولوژی نوترکیبی DNA یا مهندسی ژنتیک نامیده شدهاند و فرآیند همسانهسازی ژنها را در بر میگیرند. هدف از همسانهسازی ژن فراهم کردن نسخههای متعدد از یک ژن منفرد است. تکثیر یک ژن در حوزههای مختلف تحقیقاتی مورد استفاده است.
1-2- ابزارهای کار مهندسی ژنتیک
ابزارهای کار مهندسی ژنتیک در آزمایشگاه عبارتند از :
1- باکتری بعنوان میزبان.
2- پلاسمید (یا بقیه ناقلین) به عنوان حامل ژن.
3- آنزیم بعنوان وسیله برش و اتصال قطعات DNA به یکدیگر.
مراحل اصلی در همسانهسازی ژن عبارتند از:
1-3- آنزیمهای مورد استفاده
دستورزی DNA نیاز به بکارگیری تعدادی از آنزیمها دارد. این آنزیمها به صورت طبیعی در داخل سلول وظایف متعددی از جمله همانندسازی، نسخه برداری، ترجمه و دیگر پروسههای بیولوژیکی را بر عهده دارند. واکنشهایی که بوسیله این آنزیمها کاتالیز میشوند یک بخش ضروری از همسانهسازی ژن را تشکیل میدهند (احمدیان تهرانی، 1377). برخی از مهمترین این آنزیمها عبارتند از:
الف) آنزیمهای محدودگر: این آنزیمها اندونوکلئازهایی هستند که پیوندهای فسفودی استر داخل اسیدهای نوکلئیک را در یک توالی خاص برش میدهند. این توالی به عنوان سایت برشی آنزیم نام برده میشود. همچنین این آنزیمها براساس نوع برشی که ایجاد میکنند به دو دسته آنزیمهای تولیدکننده پایانههای صاف و پایانههای چسبنده تقسیم بندی میشوند. عموماً برای کارهای مرتبط با همسانه سازی سعی بر استفاده از آنزیم هایی است که تولید محصولات با انتهای چسبنده می کنند. زیرا در زمان لایگشن به انرژی کمتری نسبت به انتهای صاف برای اتصال نیاز دارند. توالی های برشی این آنزیم ها به صورت پالیندروم است (به عنوان مثال GGGCCC). جهت شناسایی مکان های برشی بر روی یک قطعه DNA می توان از نرم افزار هایی همچون Primer Premier 5.0 استفاده نمود. همچنین سایت های اینترنتی نیز به این منظور طراحی گردیده اند که آدرس آنها در پیوست 1 آورده شده است. جهت استفاده از این آنزیم ها نیاز است که حتماً جایگاه برشی آنها در ناحیه مطلوب و مورد نظر ما قرار داشته باشد. معمولاً این جایگاه ها را می توان با استفاده از PCR به انتهای محصولات اضافه نمود.
در این اسلاید آموزشی، در مورد الگوریتم ژنتیک توضیحاتی (به زبان انگلیسی) داده شده است. در ادامه، کلیاتی در مورد روش، کاربردهای آن، تعاریف پارامتر، ژن، کروموزوم، لوکاس و تابع هدف، تولید نسل، جمعیت اولیه، انتخاب والدین قوی، جفت گیری، تولید نسل و جهش ذکر شده است.
مقاله بیان ژن, تخلیص و بررسی کاهش لومینسانس لوسیفراز باکتریایی بر اثر جایگزینی گلوتامات 175 توسط گلایسین در زیر واحد آلفا, برای اساتید و دانشجویان شیمی در 7 صفحه