مقاله درباره مقدمه الکتروفورز

اختصاصی از سورنا فایل مقاله درباره مقدمه الکتروفورز دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 45

فصل اول

مقدمه الکتروفورز

فصل اول

1-1-الکتروفورز

1-2مقدمه:

یکی از پر کاربردترین تکنیک ها در بیولوژی مولکولی الکتروفورز نام دارد که اساس آن بسیار ساده است . لغت فورز به معنای حرکت و تحرک است و الکتروفورز در واقع حرکت ذرات تحت تأثیر میدان الکتریکی است در این تکنیک مولکول های DNA بر اساس بار و وزن مولکولی آنها جدا می شوند . معمولاً تیسلیوس را پدر الکتروفورز مدرن می شناسند او برای اولین بار در سال 1930 توانست با کمک روش خود که استفاده از لولۀU شکل محتوی با فر بود پروتئین های سرم را جدا نماید در این روش اجزاء پروتئینی سرم به علت اختلاف در حرکت ، در لولۀ مزبور از یکدیگر تفکیک شده بودند این روش ازآن جایی که در محیط محلول صورت می گرفت الکتروفورز آزاد نام گذاری گردید. یک دستگاه الکتروفورز مجموعه ای از چند قسمت می باشد که با یکدیگر در ارتباط می باشند این مجموعه شامل قسمت ها و وسایل زیر می باشد:

1) منبع تغذیه جهت برقراری پتاسیل الکتریکی

2) محلول بافر برای ثابت نگه داشتن pH

3) محیط نگهدارنده مکانی است که الکتروفورز کار اصلی خود را انجام می دهد.

1-3.محیط نگهدارنده دو کار می کند :

الف) جذب سطحی : که در مورد غیر ژل ها مانند کاغذ و غیره دیده می شود.

ب) الک یا غربال مولکول : در مورد محیط های ژلی دیده می شود که مولکول های کوچکتر سریعتر حرکت می کنند.

.

4) اطاقک که بخشی از مجموعه الکتروفورز می باشد که دارای جایگاهی برای نگهداری بافر ذخیره ای می باشد .

5) دانسیتومتر که متحرک می باشد.

به جرأت می توان گفت که الکتروفورز یکی از مفیدترین ابزارها برای بررسی و بازنگری فرایندهای حیاتی و یکی از اولین روش های عملی برای آنالیز پروتئین ها می باشد بیشترین کاربرد الکتروفورز به عنوان ابزاری آزمایشگاهی در ارتباط با شناسایی و اندازه گیری پروتئین های سرم ، هموگلوبین ، ایزوآنزیم ها و لیپو پروتئین ها می باشد. ایزوآنزیم هایی که با کمک الکتروفورز در آزمایشگاه های تشخیصی برای تعیین ناهنجاری های پروتئینی ، شناسایی انواع هموگلوبین و ایزوآنزیم ها استفاده می شود. اصول کاربر اساس جداسازی پروتئین ها یا لیپو پروتئین های موجود در سرم ادرار و مایع مغز نخاعی در یک محیط جامد در میدان الکتریکی می باشد.

در صورتی که پروتئین های سرم انسان در یک میدان الکتریکی وروی محیط جامد جداسازی شوند یک الگوی 5 باندی حاصل خواهد شد. هر گونه تغییر در این الگو در نتیجه اختلالات ژنتیکی ، تومورها ، لوسمی یا پروتین های فاز حاد می باشد از روش الکتروفورز و با کمک رنگ آمیزی های اختصاصی برای تعیین ، شناسایی و اندازه گیری چربی ها ، گلیکوژن ها و آنزیم ها نیز استفاده می شود. با تغییر در شرایط الکتروفورز ، محیط جامد مورد استفاده و روش های مختلف آشکارسازی، جداسازی و شناسایی پروتئین های مختلف ممکن می گردد هم چنین همراهی واکنش های ایمونوپرسی پیتاسیون با الکترفورز ، چشم انداز جدیدی از امکانات را در مقابل چشمان محققین گشوده است . تفسیر نتایج حاصل از الکتروفورز لیپو پروتئین های سرم در تشخیص اختلالات موجود در نقل و انتقاال لیپیدها که زمینه ساز بیماری های قلبی عروقی هستند اهمیت دارد در آزمایشگاه های تشخیص طبی ایزوآنزیم های کراتین کیناز(cpk) ولاکتات دهیدروژناز(LDH ) و آلکالن فسفا تاز به صورت روتین انداه گیری شده و مورد بررسی قرار می گیرند. با انجام الکتروفورز در شرایط به خصوص و جداسازی ایزوآنزیم های ck1 که در آسیب های مغزی افزایش می یابد. Ck2 و نسبت در انفارکتوس میوکارد ، افزایش ck3 در دیستروفی عضلانی دوشن، انفارکتوس ریه با افزایش LD3 و بیماری های کبد با افزایش LD3 و LD4 به تشخیص کمک می کند . در تشخیص آنمی ها نیز از الکتروفورز هموگلوبین برای شناسایی انواع مختلف هموگلوبین ها استفاده می شود.